Hlavní Tracheitida

Vyšetření sputa na tuberkulózu (mykobakterie, MBT)

Chcete-li zjistit onemocnění v počátečním stadiu, musíte složit test sputa na tuberkulózu (mikroskopie a kultivační nádrž).

Sputum je slizniční sloučenina nacházející se v průduškách a plicích. Za normálních zdravotních podmínek se tyto sloučeniny vůbec netvoří. A s oslabenou imunitou nebo jinými doprovodnými faktory se produkce takové sekrece v průduškách prudce zvyšuje. A to přispívá k rychlému vstupu bacilů tuberkulózy do sputa s následnou infekcí těla. Pokud kašel trvá déle než 1 měsíc, je nutné provést fluorografii. Pokud se na obrázku objeví pečeť o průměru větším než 1 cm, bude osoba odeslána k analýze sputa na tuberkulózu..

Obecná informace

Pokud je člověk nakažen Kochovým bacilem, pak jistě vyjde sputum, i když v malém množství. Barvou má hnisavý slizký odstín s malými krvavými skvrnami..

Přítomnost krve je typická pro pokročilé stádium tuberkulózy (kavernózní). V počátečních fázích infekce není krev prakticky pozorována. Obecná analýza sputa v pokročilejších stádiích může navíc ukázat krystaly a elastická vlákna. Kromě toho se zvyšuje hladina proteinových sloučenin a jsou přítomny tuberkulózní bacily.

Analýza sputa se provádí pomocí bakteriologického nátěru (provádí se nátěrová mikroskopie, poté její výsev), která se zkoumá později pod mikroskopem.

Pokud je výsledek negativní, je bezpodmínečně nutné znovu otestovat přítomnost tuberkulózních bacilů a sloučenin. Druhý test se provádí nejdříve za 1 měsíc.

Algoritmus analýzy sputa

  1. Po odběru biomateriálu je připraven speciální nástroj, který pomůže vyšetřit bakteriologické sloučeniny pod mikroskopem.
  2. Dále se mezi dvěma laboratorními zrcadly třese sputum umístěné přes hořák.
  3. Pro správnou studii biologického materiálu na přítomnost tuberkulózních patogenů je nutné jej obarvit speciálním prostředkem podle metody Gross nebo Ziehl-Nilson.
  4. Analýza sputa pro mycobacterium tuberculosis v první studii ukazuje úroveň citlivosti asi 80%. S každým dalším zvýšením citlivosti až 98%.
  5. Kultivační nádrž na sput by se neměla objevit později než 2 hodiny po odběru.
  6. Po zjištění mykobakterií se stanoví citlivost na některá antibiotika.
  7. Koncentrace tuberkulárních bacilů přesahující 100 na 1 ml naznačuje velmi těžkou formu onemocnění.

Test musí být proveden nejméně třikrát, protože s každým novým plotem je výsledek přesnější. Pokud je po první analýze negativní, neznamená to nepřítomnost onemocnění. Pro konečný verdikt musíte získat negativní výsledek alespoň třikrát. Kromě toho může mluvit o nejranějším stadiu vývoje onemocnění, ve kterém je stále nemožné identifikovat tuberkulózní bacil.

Obecná pravidla pro odběr sputa

Pokud uvažujete o otázce: Jak se nechat otestovat na tuberkulózu, pomůže vám následující doporučení:

  • Před odběrem sputa lékař vydá speciální nádobu, do které musíte materiál odebrat;
  • Chcete-li vyčistit ústní dutinu od zbytků jídla - vypláchněte si ústa a vyčistěte zuby;
  • Před odběrem nasajte co nejvíce vzduchu do plic a kašlete;
  • Po vykašlávání vyplivněte materiál do nádoby a pevně uzavřete víko;
  • Nedovolte, aby se do nádoby dostaly sliny, je nutná sputa z plic;
  • Pokud nemůžete dostat hlen s kašlem, musíte klepat pěstí na hrudník nebo dýchat nad horkou párou a postup opakovat;
  • Pokud není možné znovu shromáždit tajemství, je pacientovi předepsán bromhexin nebo ambroxol.

Metody výzkumu

Celkově existují 2 metody diagnostiky sputa při tuberkulóze: bakteriologické a mikroskopické. V obou případech bude dešifrování ve formě CUB + nebo CUB-. Studie sputa na tuberkulózu končí definicí patogenních mykobakterií ve složení nebo jejich úplnou absencí.

  1. Při negativním CFR je vyloučena možnost infekce tuberkulózou a přetrvávající kašel může naznačovat další infekci plic.
  2. V přítomnosti CUB + se provede další enzymová imunotest. ELISA také odkazuje na laboratorní metody pro plicní tuberkulózu. Může vám pomoci stanovit přesnější diagnózu..

Algoritmus IFA je následující:

  • Sputum se zředí ve speciálním roztoku a přidají se specifické protilátky;
  • Po kombinaci těchto složek se stanoví, kolik antigenních sloučenin je v bakteriologickém prostředí..
  • Na základě těchto údajů se stanoví, kolikrát je překročena koncentrace mykobakterií v 1 ml. vyšetřovaná kapalina. Na základě výsledku je stanovena diagnóza a je vyvinut další léčebný režim..

Při bakteriální metodě se shromážděný materiál umístí do speciálního média, které podporuje růst mykobakterií. Po 10-20 dnech se provádí výzkum na přítomnost tuberkulózních sloučenin a jejich koncentraci. Testování pomocí této metody trvá poměrně dlouho, protože kultivace patogenních bakterií v laboratorních podmínkách trvá dlouho. V některých případech může doba provedení přesáhnout 1 měsíc. Z tohoto důvodu tato metoda ztratila u pacientů popularitu..

Bezpečnostní inženýrství

Tento článek má pouze informativní charakter a nejedná se o přímý průvodce akcí. Než si sami nařídíte jakékoli testy, musíte se určitě poradit se svým lékařem a řídit se jeho pokyny..

Kolik a termín

Cena diagnostických testů přímo závisí na laboratoři, ve které bude výzkum prováděn, a na umístění. Například náklady na služby v Moskvě budou stát víc než v Samaře a naopak. Chcete-li získat potřebné informace, musíte zavolat do registru laboratorní instituce a zkontrolovat jej. Náklady obvykle nepřesahují 400 rublů.

Doba analýzy je poměrně krátká, příprava všech výsledků trvá jen 2 pracovní dny.

Laboratorní metoda pro detekci MBT

Studie sputa v ordinaci má velký epidemiologický a klinický význam..

Je lepší sbírat sputum ráno. Pacient si musí nejprve vypláchnout ústa, aby bylo ve sputu méně slin. S malým množstvím sputa se shromažďuje během dne. Při absenci sputa by měl být jeho vzhled způsoben dráždivou inhalací aerosolu hypertonického roztoku chloridu sodného se sodou. Vyšetřete také vodu z výplachu průdušek získanou po zavedení 10–12 ml teplého izotonického roztoku chloridu sodného do průdušnice.

Vyšetření sputa začíná jeho vyšetřením. U pacientů s plicní tuberkulózou mohou mít sputa pruhy nebo krevní sraženiny, kousky kalcifikovaných bronchiálních kamenů - bronchiolitidu. Mikroskopické vyšetření obarvených skvrn sputa u pacientů s destrukcí plicní tkáně odhalí elastická vlákna. Někdy existují takzvaná korálová vlákna, která se tvoří v důsledku ukládání mastných kyselin na elastických vláknech, stejně jako vápna pokrytá elastická vlákna a amorfní částice vápna. Aby se zjistil ve sputu v kanceláři, je opakovaně vyšetřován a posílá ranní část do laboratoře po dobu nejméně 3 po sobě následujících dnů. V některých případech lze MBT detekovat ve sputu a při absenci rentgenových změn v plicích nelze v tomto případě vyloučit ulcerózní tuberkulózu průdušek. Testování sputa by mělo být provedeno před zahájením anti-TB chemoterapie..

Detekce MBT v patologickém materiálu se provádí bakterioskopickými, bakteriologickými (kulturními) a biologickými metodami. Kromě sputa může být předmětem studia v kanceláři také moč, výkaly, mozkomíšní mok, exsudát z dutin, biopsie různých tkání..

Hlavní metoda detekce MBT je bakterioskopická. V mnoha rozvojových zemích se široce používá nejen k diagnostice, ale také k identifikaci pacientů s tuberkulózou během hromadných průzkumů populace..

Při přímé bakterioskopii se přípravek obarví podle Ziehl-Nielsenovy metody: nejprve karbolovým roztokem fuchsinu a poté se po zbarvení 5% roztokem kyseliny sírové nebo 3% roztokem chlorovodíkového alkoholu obarví 0,25% roztokem methylenové modři. Barevné přípravky se mikroskopicky ponoří do systému. MBT jsou zbarveny červeně a okolní pozadí a mikroorganismy odolné vůči kyselinám - modře (obr. 5).

Rozlišení bakterioskopické metody detekce MBT se zvyšuje o 14-30% při použití luminiscenční mikroskopie. K barvení léku se používají fluorochromy - organická barviva, která fluoreskují, když jsou osvětlena ultrafialovým, fialovým nebo modrým paprskem. Takovými barvivy jsou auramin 00, rhodamin C. Léčivo se zkoumá pomocí fluorescenčního mikroskopu. MBT záře zlatožlutá na tmavém pozadí (obr.6).

Pro detekci bakterioskopickou metodou MBT v přípravku je nutné, aby v 1 ml sputa bylo obsaženo nejméně 100 000 mikrobiálních těl. S menším počtem mykobakterií může studie dát falešně negativní výsledek. Ke zvýšení množství MBT v jednotce zkoumaného objemu sputa se používají flotační a sedimentační metody, zejména s negativními výsledky přímé bakterioskopie.

Nejrozšířenější metodou je flotace, založená na skutečnosti, že po protřepání vodná suspenze s uhlovodíkem vypluje MBT na povrch společně s vytvořenou pěnou. Jako uhlovodíky se používají benzín, benzen, xylen. Jako materiál pro přípravu přípravků slouží krémový (flotační) prstenec vytvořený na povrchu uhlovodíkových částic s mykobakteriemi. Při použití flotační metody se pozitivní výsledky bakterioskopie zvyšují o 10%.

Bakteriologická (kulturní) metoda detekce MBT spočívá v zasetí sputa na živné médium. Před setím je sputum zpracováno, aby se potlačil růst nespecifické flóry sputa. Standardní živné médium pro kultivaci MBT je pevné vaječné médium Levenshtein-Jensen. Existují také polotekutá a kapalná kultivační média. K růstu kultury MBT dochází za 14-90 dnů.

K izolaci kultury MBT stačí 20–100 mikrobiálních buněk v 1 ml sputa. Získání čisté kultury mykobakterií umožňuje určit jejich životaschopnost, virulenci i citlivost na léky.

Mykobakterie detekované během bakterioskopie nerostou na živném médiu kvůli ztrátě schopnosti reprodukovat se pod vlivem chemoterapie. Podle bakteriologické studie se provádí kvantitativní hodnocení bakteriální exkrece: sporé - až 10 kolonií na médiu, střední - od 10 do 50 a hojné - více než 50 kolonií.

Biologická metoda spočívá v kontaminaci sputa morčat, která jsou vysoce citlivá na MBT. Před infekcí morčete se sputum ošetří kyselinou sírovou, aby se zničila nespecifická mikroflóra, a odstředí se. Sediment v izotonickém roztoku chloridu sodného se injikuje subkutánně do oblasti rozkroku, intraperitoneálně nebo do varlat. Aby se snížila rezistence morčete na MBT, denně se injekčně podávají velké dávky kortizonu. Asi měsíc po infekci příušnice zvětšila lymfatické uzliny a vyvíjí generalizovanou tuberkulózu.

Až donedávna byla mezi metodami detekce MBT a diagnostiky tuberkulózy považována za nejcitlivější biologická metoda, protože tuberkulóza u morčat může být způsobena injekcí sputa obsahujícího méně než 5 mikrobiálních tělísek v 1 ml. V současné době byla prokázána možnost ztráty virulence MBT. Takové mykobakterie jsou životaschopné, mohou růst na živném médiu, ale nezpůsobují onemocnění u experimentálních zvířat. Proto je pro identifikaci MBT v patologickém materiálu nutné použít různé metody mikrobiologického výzkumu..

Krevní test. Malé změny jsou obvykle pozorovány v krvi pacientů s tuberkulózou. Hypochromní anémie je stanovena pouze u pacientů s rozšířeným procesem a těžkou intoxikací nebo s opakovaným plicním krvácením. ESR se zvyšuje během období exacerbace tuberkulózního procesu. Ke změnám v počtu leukocytů a krevního obrazu leukocytů dochází hlavně během akutních procesů a rozpadu plicní tkáně. Může se objevit leukocytóza, zvýšení bodavých neutrofilů, lymfopenie, monocytóza, eosinopenie..

K posouzení stavu pacienta, jeho nespecifické a specifické reaktivity, stanovení aktivity tuberkulózního procesu a výběru optimální taktiky léčby je nezbytné určit některé biochemické a imunologické parametry.

U pacientů s tuberkulózou, vylučujících velké množství sputa, s hojným hnisavým pleurálním exsudátem, amyloidovou dávkou ledvin, může nastat hypoproteinémie, na rozdíl od pacientů s jinými formami tuberkulózy. Při akutním tuberkulózním zánětu klesá koeficient albumin-globulin, zvyšuje se obsah fibrinogenu a sialových kyselin v plazmě a objevuje se C-reaktivní protein.

Pro kontrolu funkčního stavu jater v krvi se zkoumá obsah alaninu a aspartátaminotransferáz, alkalické fosfatázy, bilirubinu, stanoví se hladina zbytkového dusíku, močoviny, kreatininu a provedou se koagulační testy s krevním sérem - thymol, sublimát. Aby se vyloučil diabetes mellitus, který je často kombinován s tuberkulózou, stanoví se hladina cukru v krvi.

K potvrzení tuberkulózní etiologie onemocnění se používá enzymová imunotest na základě reakce antigen-protilátka. Pokud existuje podezření na imunodeficienci v krevním séru, stanoví se obsah imunoglobulinů. K diagnostice imunodeficience a kontrole jejího průběhu se stanoví počet B- a T-lymfocytů.

U aktivní tuberkulózy jsou všechny imunologické reakce pozitivní a jejich závažnost závisí na fázi tuberkulózního procesu. U pacientů s příznivým průběhem tuberkulózy je nejvýraznější reakce blastové transformace lymfocytů a u pacientů s progresivním průběhem reakce inhibice migrace leukocytů v přítomnosti tuberkulinu PPD. S vypuknutím procesu klesá počet lymfocytů tvořících T-růžici a zvyšuje se počet lymfocytů tvořících B-růžici, zatímco klesá obsah G- a A-imunoglobulinů.

Imunologické testy se používají pro diferenciální diagnostiku tuberkulózy. Například u rakoviny a sarkoidózy, na rozdíl od tuberkulózy, dochází k potlačení aktivity G-lymfocytů při reakci blastové transformace s PHA, u většiny pacientů jsou negativní reakce blastové transformace lymfocytů a migrace leukocytů s PPD.

Vyšetření moči. U pacientů s plicní tuberkulózou obvykle analýza moči neposkytuje významné diagnostické informace, ale někdy odhalí závažné komplikace základního onemocnění. U tuberkulózy ledvin se v moči nacházejí bílkoviny, leukocyty, často erytrocyty a MBT. Při komplikaci plicní tuberkulózy amyloidózou jsou pozorovány přetrvávající proteinurie a mikrohematurie. Vylučováním 17-ketosteroidů a 17-oxykortikosteroidů denní močí se hodnotí funkční stav kůry nadledvin.

Detekce mykobakterií analýzou sputa

Tuberkulóza je nebezpečné onemocnění způsobené několika druhy mykobakterií. Nemoc může postihnout různé orgány člověka: plíce, oči, nervový systém, ale nejběžnějším typem tuberkulózy je plicní forma. Patogen je přenášen vzdušnými kapičkami, slinami, krví, někdy půdou nebo jídlem.

Včasná diagnóza tuberkulózy má společenský význam. Obvykle se za účelem zjištění onemocnění u celé populace mladší 14 let každoročně provádí tuberkulinový test - Mantouxova reakce, později - každoroční fluorografie. Existují situace, kdy se dětský test Mantoux ukázal jako pozitivní nebo na obrázku bylo zjištěno ztmavnutí - podezření padá na tuberkulózu. V těchto případech je nutná další diagnostika, která by koordinovala další léčebná opatření nebo odstranila podezření na onemocnění..

Analýza sputa k detekci tuberkulózy je jednou z nejpřesnějších metod identifikace patogenů. Vyžaduje více vzorků, ale toto opatření je zárukou jeho spolehlivosti. Můžete si jej vzít zdarma s doporučením lékaře v tuberkulózním lékárně nebo na soukromé klinice.

Indikace a kontraindikace pro analýzu

Analýza sputa pro tuberkulózu může odhalit plicní formu onemocnění. Obvykle je jeho indikací prodloužený kašel (se sputem nebo bez něj), ztmavnutí na rentgenovém paprsku a zvýšení teploty pacienta. Studium sputa je součástí komplexu povinných studií, které jsou nezbytné pro diagnostiku tuberkulózy.

Bezpochyby se také odebírá sputum pro mycobacterium tuberculosis, když pacient po dlouhou dobu (déle než 3 měsíce) trpí suchým nebo neproduktivním kašlem, který nereaguje na standardní léčbu léky na bronchitidu. Současně je třeba věnovat pozornost složení sputa, pokud je přítomno: s plicní tuberkulózou je oddělena v malém množství, ve složení je mukopurulentní (zakalená bílá, nažloutlá, šedavě zbarvená), v pozdějších stadiích má krevní pruhy.

Vzhledem k tomu, že analýzu sputa pro CD (původce tuberkulózy) lze provést nejen přímým vykašláváním, ale také pomocí bronchoskopie, má určité kontraindikace.

Bronchoskopii pro tuberkulózu lze provést pro diagnostické účely, pokud má pacient suchý kašel bez vylučování sputa a není možné jej shromáždit v nádobě.

Odběr sputa bronchoskopií zahrnuje zavedení trubice do horních cest dýchacích pomocí lokální nebo celkové anestézie. Vzhledem ke specifikům postupu jej nelze provést:

  • lidé, kteří jsou alergičtí na léky proti bolesti,
  • pacienti, kteří měli infarkt nebo cévní mozkovou příhodu v následujících 6 měsících před vyšetřením,
  • pacienti s epilepsií a schizofrenií,
  • pacienti se závažným respiračním selháním,
  • pacienti s poruchami krvácení,
  • se stenózou hrtanu nebo průdušnice.

U dětí se bronchoskopie provádí se souhlasem rodičů. V závislosti na věku dítěte se rozhoduje o celkové nebo lokální anestezii. Existuje více indikací pro tento postup, pokud máte podezření na tuberkulózu, než kontraindikací.

Postup bronchoskopie je bezpečný a zřídka způsobuje komplikace (asi 1 z 5 000 případů), z nichž většina je reverzibilní. Komplikace jsou možné pouze při nouzové bronchoskopii (pokud se neprovádí pro diagnostiku, ale pro účely resuscitace - například k odstranění cizího předmětu).

Příprava, průběh a přepis

Jak darovat sputum pro analýzu? Před provedením studie lékař obvykle podrobně vysvětlí, jak to udělat správně. Pokud je pacient podezřelý z plicní tuberkulózy, sputum se podá třikrát, aby se získal spolehlivý výsledek.

Poprvé je nutné sbírat sputum ráno na lačný žaludek, po předchozím projednání s lékařem o nutnosti vzít expektorans.

Doporučuje se před testováním vypláchnout ústa vodou. Sputum při kašlání (které se pravidelně vyskytuje u pacienta s tuberkulózou) vyplivne do speciální sterilní nádoby, která je pacientovi před diagnostikou předběžně podána.

Podruhé je nutné projít sputem 4 hodiny po prvním testu, také na prázdný žaludek. Aby nedošlo k hladovění pacienta, obvykle se první vzorek odebírá v noci, druhý ráno. Pravidla pro odběr sputa zajišťují dohled nad zdravotnickým personálem pro správné shromažďování testů, ale je také možné, aby si pacient materiál sbíral samostatně. Třetí, naposledy, sputa se odebírá za den. Shromážděný materiál musí být předán do laboratoře nejpozději 2 hodiny po umístění do nádoby.

Při odběru sputa bronchoskopií by se měl pacient připravit předem: nejezte a nepijte nejméně 6 hodin. Obvykle se test na tuberkulózu sputem provádí ráno. Pacientovi je v závislosti na jeho stavu podána lokální nebo celková anestézie, po které je do hrdla zaveden bronchoskop do průdušnice, pomocí kterého lékař buď odebere sputum k vyšetření, nebo odstraní jeho přebytek z průdušek, aby zajistil normální dýchání. Po vyšetření je pacientovi zakázáno užívat léky na ředění krve (aspirin).

Pokud je nutné provést bakterioskopickou studii, provede se kultivace sputa, nebo spíše kultura bakterií, které obsahuje.

K tomu je připraven přípravek - sputum se vtírá mezi kousky skla, obarví se speciální směsí a zahřeje se. Poté laboratorní asistent vyhodnotí inokulum - podívá se, jaké bakterie na sklenici narostly a na základě nich učiní závěr o stavu pacienta.

K dešifrování výsledků analýzy sputa se hodnotí:

  • množství, barva,
  • konzistence,
  • inkluze (krev nebo jiné),
  • bakteriologické složení.

Je nutné provádět studie mnohokrát, aby se vyloučila možnost falešně negativního výsledku - k tomu může dojít, pokud počet bakterií v konkrétním vzorku není dostatečný k tomu, aby byl stanoven testem. Analýza sputa pro spolehlivost je nutná nejméně třikrát, i když jsou-li výsledky nejednoznačné, mohou být nutné další vzorky.

Klady a zápory analýzy

Analýza sputa pro VC (nebo CD) má jednoznačné plus: je to příležitost k identifikaci onemocnění v raných stádiích a potvrzení s téměř stoprocentní přesností. Test, který poskytuje několik vzorků, vám umožňuje jednoznačně určit přítomnost patogenů tuberkulózy v těle. Umožňuje určitou variabilitu chování, která je vhodná pro pacienty v různých podmínkách..

Pokud nemluvíme o bronchoskopii, je test pro pacienta poměrně jednoduchý a nevyžaduje k jeho provedení speciální školení..

Nevýhodou analýzy sputa je dlouhé čekání na výsledky. Vzhledem ke své univerzálnosti bude bakteriologický test muset počkat 3 až 8 týdnů - je to způsobeno zráním bakteriálních kultur. Mezi nevýhody také patří skutečnost, že pokud existuje podezření na tuberkulózu, ale neexistuje kašel, pak pacient bude muset podstoupit nejjednodušší postup bronchoskopie, navíc to udělat opakovaně.

Metoda nemá žádné vedlejší účinky, nevyžaduje dárcovství krve ani podávání žádného léku. Odběr materiálu (sputa) ve skutečnosti probíhá pro pacienta přirozeně bez jakýchkoli obtíží. Tato skutečnost je obzvláště důležitá pro děti, které mají potíže s odběrem krve nebo jinými diagnostickými postupy..

Pro získání spolehlivého výsledku je nutné studovat materiál získaný různými metodami - to určuje dobu laboratorní diagnostiky. Pouze bakteriologická analýza zcela nevylučuje možnost onemocnění - je také nutné naočkovat sputum na živná média, což trvá poměrně dlouho.

Výhodou analýzy sputa je také skutečnost, že analýza kvalitativního složení umožňuje identifikovat různá onemocnění horních cest dýchacích, nejen bakteriologické povahy, ale také nádorové a obstrukční procesy (rakovina plic, bronchiální astma atd.). Umožňuje tedy nejen potvrdit nebo vyloučit tuberkulózu, ale také s vysokou přesností stanovit příčinu nemoci pacienta..

Články O Zánět Hltanu